一种雪花肉牛胚胎玻璃化快速冷冻保存方法

本发明涉及生物快速冷冻保存技术领域，且公开了一种雪花肉牛胚胎玻璃化快速冷冻保存方法，旨在解决现有胚胎冷冻保存技术操作繁琐耗时、胚胎活力易受损及保存方案缺乏针对性的问题。该方法包括非手术冲胚采集桑椹胚或囊胚阶段胚胎、改良磷酸盐缓冲液预处理、乙二醇和二甲基亚砜多梯度保护剂平衡、开放式拉细玻璃麦管快速冷冻及两步法复苏等步骤，并针对不同发育阶段胚胎采取差异化处理策略。通过梯度平衡处理和精确时间控制实现冷冻保护剂渗透平衡最佳化，通过开放式拉细玻璃麦管与两步冷冻法结合显著缩短胚胎暴露于非生理温度环境的时间。该方法操作流程简化，有效降低胚胎活力下降风险，提高冷冻复苏后胚胎存活率和后续发育能力。