一种纯化人重链铁蛋白的简易方法

本发明公开了一种纯化人重链铁蛋白的简易方法，该方法包括：将含人重链铁蛋白基因的重组工程菌诱导表达后收集菌体；采用含3~5M尿素的裂解缓冲液对菌体进行裂解；将裂解上清在70~85℃下加热处理5~15分钟去除热不稳定杂蛋白；将加热处理后的上清进行镍柱亲和层析，以含尿素的梯度浓度咪唑缓冲液洗脱并收集含人重链铁蛋白的洗脱组分；将洗脱组分经超滤置换后进行蔗糖密度梯度超速离心获得人重链铁蛋白单体。本发明通过将尿素引入裂解缓冲液并配合优化的加热处理温度，省略了现有技术中必经的凝胶层析步骤，简化了纯化流程，降低了成本，单次纯化可获得蛋白浓度1.65mg/mL的人重链铁蛋白溶液6mL，产物纯度高、均一性好。