一种改良小鼠气道上皮细胞提取方法

本发明公开了一种改良小鼠气道上皮细胞提取方法，包括以下步骤：（1）无菌条件下获取小鼠气管及主支气管组织，漂洗后沿气道纵向剖开切割成小块；（2）将组织小块均匀分布于细胞培养瓶的干燥内底表面，将培养瓶翻转使瓶底朝上，静置培养；（3）将培养瓶缓慢翻转回正常，静置培养，3‑7天后见上皮样细胞从组织块边缘主动迁出；（4）当迁出的上皮样细胞生长融合至70%‑90%面积时，进行消化传代；（5）将消化后的细胞扩增后进行气‑液界面分化培养。本方法为能够兼顾高细胞活性、稳定增殖能力和功能性维持的新型培养方法，采用改良的组织块物理贴壁策略，通过关键的反转培养瓶干燥贴附步骤，最大限度地保护了原代细胞的天然活性与增殖潜能。