一种高活性和糖型优化的SOD3融合蛋白及其制备方法

本发明涉及一种高活性和糖型优化的SOD3融合蛋白及其制备方法，属于超氧化物歧化酶技术领域，基因构建：通过PCR技术扩增SOD3基因片段和目标融合伴侣的基因片段，使用限制性内切酶将两者连接到原核表达载体中，构建重组表达质粒；转化与表达：将重组表达质粒转入大肠杆菌感受态细胞，通过诱导剂诱导蛋白表达，16‑25℃培养温度诱导12‑16h。pGEX‑4T质粒载体经过特别优化，与GST标签搭配，能非常有效地在大肠杆菌中促进SOD3以可溶性形式表达，直接从源头提高了后续实验的原料质量和得率，GST标签与谷胱甘肽‑琼脂糖柱之间有高亲和力、高特异性的结合，采用梯度调整温度的方式将不同温度的稳定剂加入可溶性蛋白粗提液当中，增加可溶性蛋白粗提液的活性。