基于伴侣蛋白辅助折叠的高活性透明质酸酶及其制备方法

本发明属于酶工程技术领域，具体涉及一种基于伴侣蛋白辅助折叠的高活性透明质酸酶及其制备方法，包括如下步骤：S1，构建包含Hylp1融合蛋白编码序列的重组载体pET32(a)‑TrxA‑6H‑DDDDK‑Hylp1；S2，将重组载体转化至大肠杆菌宿主细胞中，筛选阳性工程菌低温诱导表达，得到表达菌体；S3，破碎表达菌体，获得细胞裂解上清液；S4，取细胞裂解上清液进行镍柱亲和层析，并采用预处理的葡聚糖凝胶G‑25层析对融合蛋白进行脱盐处理，收集融合蛋白溶液；S5，对融合蛋白溶液进行肠激酶定点切割处理，得到酶切产物；S6，将酶切产物再次进行镍柱亲和层析，收集含目的蛋白的流穿液；S7，将流穿液进行阴离子交换层析，获得高纯度的重组透明质酸酶Hylp1。