一种基于微流控芯片的数字PCR检测EGFR突变的方法

本发明提供了一种基于微流控芯片的数字PCR检测EGFR突变的方法，涉及数字PCR检测技术领域，该方法包括：提供样本DNA；配制包含特异性引物探针的数字PCR反应体系；将体系加样至微流控阵列芯片生成超过2万个微反应单元；进行PCR扩增；检测FAM、HEX、ROX、CY5四通道荧光信号；并依据特定标准判读结果。本发明首次明确了该平台的关键参数，如上样量需≤10野生拷贝/反应，并确立了科学的判读阈值。该方法线性范围宽、检出限低、精密度良好，与NGS对比对高频突变一致性高，且能有效检出NGS难以发现的低频突变，为NSCLC的液体活检提供了标准化、高灵敏的检测方案。