高灵敏度多重甲基化检测技术的应用

本发明提供了从血液等样本中高灵敏度检测肿瘤甲基化DNA的多重检测技术MMDEC，属于疾病诊断标记物领域，更具体的，涉及一种用于通过如下方式检测靶标DNA的甲基化的方法：构建寡核苷酸，其包含能够与多个肿瘤特异性的高甲基化的CG岛靶标DNA互补结合的靶标特异性多重Rooptag引物和与特异性多重Rooptag引物结合的通用tag引物；通过使用特异性多重Rooptag引物作为初级引物对多重甲基化靶标DNA进行指数扩增得到多重扩增产物；使用通用tag引物作次级引物的寡核苷酸(其能够与该线性扩增的靶标DNA互补结合)对得到的多重扩增引物进行均一性扩增；并且通过探针检测是否存在扩增产物。本发明公开的方法MMDEC可以用于血浆/尿液样本肿瘤的早期筛查和诊断，基于研究成果符合临床实际，具有良好的临床应用前景。