核苷四磷酸合成酶突变体及其制备方法和应用

本发明涉及生物技术领域，具体涉及核苷四磷酸合成酶突变体及其制备方法和应用。本发明提供了一种易于规模化表达的核苷四磷酸合成酶，该类酶天然能识别Np4N底物，但天然酶以水解Np4N活性为主，通过工程化改造能很好的逆转其功能，显著提高其在合成Np4N的能力；本发明还提供了一种高效的化学‑酶结合催化法制备Np4N的方法，通过化学法一步活化NMP底物成NMP‑Im后，其合成效率进一步提升。该方法反应条件温和、转化效率高、副产物少且容易放大规模化，适宜工业化推广应用。