一种基于分离式绿色荧光蛋白的大肠杆菌启动子筛选系统及筛选方法

本发明涉及分子生物学和蛋白质工程领域，特别涉及一种基于分离式绿色荧光蛋白的大肠杆菌启动子筛选系统及筛选方法。该系统利用分离式GFP的荧光重组原理，构建了一种单质粒高通量筛选平台。该平台包含一个启动子库，能够在单个质粒中同时表达目的蛋白‑GFP11片段和GFP1‑10片段。当目的蛋白表达水平较高时，GFP11能够与GFP1‑10重组形成完整的GFP，产生荧光信号。通过测量荧光强度和菌体浓度的比值，可高效筛选出适合目的蛋白高效可溶性表达的优化启动子。该发明操作简单、成本低廉、高通量筛选，可广泛应用于蛋白质表达条件优化和基因工程领域。