通过runx2b启动子甲基化编辑调控鱼类骨骼发育的方法及其应用

本申请属于生物技术领域，具体涉及表观基因组编辑斑马鱼的构建方法、靶向斑马鱼runx2b基因启动子区域的sgRNA及其应用。本申请提供了一种表观基因组编辑斑马鱼的构建方法，包含使用CRISPR/dCas9‑甲基转移酶系统靶向runx2b基因启动子区域进行甲基化编辑，从而抑制runx2b基因表达并减少肌间骨形成。该方法通过表观遗传编辑技术在不改变DNA序列的前提下，精确调控runx2b基因的表达水平，有效减少了鱼类肌间骨的形成。使用该方法处理的斑马鱼F0代表现出runx2b mRNA表达水平显著降低，成年F0代鱼第11至16肌节区域的肌间骨显著短于对照组，缩短幅度达23.3％至38.8％。此外，该方法通过精确调控关键经济性状基因的表达模式，同时保持基因组DNA完整性，为改良鱼类经济性状提供了理论基础和技术支撑。