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一种针对初级纤毛的兔多克隆抗体及其制备方法
发明专利有效
6权利要求 · 2 独立
§ Ⅰ
卷宗概要
发明人
蔡威; 汤睿智; 章宏峰; 张姮; 王辉; 罗波; 周磊; 王向阳
IPC 分类
C07K 16/18 (2006.01)C07K 16/06 (2006.01)
本发明提供了一种针对初级纤毛的兔多克隆抗体及其制备方法,属于生物技术领域,包括以下步骤:将人源ARL13B蛋白的200‑428号氨基酸序列作为目标片段,密码子优化后合成基因并克隆至pet‑32a表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,经过纯化得到高纯度免疫原蛋白;合成基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,高纯度免疫原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;将高纯度免疫原蛋白免疫新西兰大白兔,获得免疫血清;将免疫血清纯化后得到兔多克隆抗体。本发明制备的兔多克隆抗体具有更高的特异性和信号强度,经ELISA检测,效价可达1:64000以上,在石蜡切片免疫荧光实验中能够更清晰地标记初级纤毛,显著降低了背景噪声,提高了实验结果的可靠性。