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기록

一种包含蛇毒蛋白的融合蛋白及其在生物合成稳定同位素标记蛇毒蛋白中的应用

발명유효
10청구항 · 8 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

马常兴; 袁静

IPC 분류

C07K 19/00 (2006.01)A61K 51/08 (2006.01)C12N 15/70 (2006.01)C12N 1/21 (2006.01)C12P 21/00 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)

本发明提供了一种包含蛇毒蛋白的融合蛋白及其在生物合成稳定同位素标记蛇毒蛋白中的应用,属于基因工程及蛋白制备技术领域;所述融合蛋白包括顺次连接的6聚组氨酸标签、融合标签、WELQ蛋白酶的酶切位点和蛇毒蛋白。本发明的融合标签可提高蛇毒蛋白融合蛋白的溶解性;6聚组氨酸标签和融合标签可通过WELQ蛋白酶酶切去除,且酶切去除效果好,可保障蛇毒蛋白的天然结构与活性;此外,采用含有同位素标记的唯一氮源或唯一碳源的培养基对表达所述融合蛋白的重组菌进行诱导培养,诱导表达含目标蛇毒蛋白的融合蛋白,再经纯化、WELQ蛋白酶酶切等,可获得纯度达95%以上、标记效率超91%的稳定同位素标记蛇毒蛋白。