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기록

一种靶向FGFR4的PROTAC蛋白降解药物的筛选模型

발명유효
12청구항 · 1 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

张晓颖; 黄海洪; 陈晓光; 季鸣; 李刚; 张东峰; 张婧瑜; 郑皓

IPC 분류

C12N 1/21 (2006.01)C12N 15/70 (2006.01)C12N 15/65 (2006.01)C12N 15/12 (2006.01)G01N 21/64 (2006.01)C12Q 1/02 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)

本发明涉及药物研发技术领域,公开了一种高通量快速筛选PROTAC蛋白降解药物的筛选模型。该模型选用细胞培养用96孔板,通过酶标仪检测外源目的蛋白所带绿色荧光强度,快速筛选PROTAC化合物的蛋白降解活性。该模型在检测以FGFR4为靶点的PROTAC化合物降解活性时,包括以下步骤:⑴将FGFR4基因插入带有绿色荧光标签的TurboGFP‑Vector质粒;⑵瞬时转染HEK293T细胞24小时;⑶加入PROTAC化合物处理细胞24小时;⑷酶标仪于Ex482nm/Em502nm波段检测荧光值,以判断PROATC化合物特异性降解外源FGFR4蛋白表达的活性。本模型采用的细胞培养用96孔板可以达到高通量的活细胞筛选,并且利用瞬时转染质粒的方法表达外源的目的蛋白,更为省时、简便、经济、可重复性强。