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기록

一种用于猪肺类器官构建的多酶消化体系及消化方法

발명유효
9청구항 · 5 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

郑先瑞; 李文玺; 马淑雅; 殷宗俊; 刘剑锋; 包文斌; 王海飞; 孙裴; 肖叶懿; 李杰

IPC 분류

C12N 5/071 (2010.01)C12Q 1/02 (2006.01)

本发明涉及类器官技术领域,公开了一种用于猪肺类器官构建的多酶消化体系,所述消化体系包含胶原酶I、胶原酶II、胶原酶IV、DNaseI、中性蛋白酶和AdvancedDMEM/F12培养基;其中,各组分的工作浓度分别为:胶原酶I400–500U/mL,胶原酶II100–200U/mL,胶原酶IV40–60U/mL,DNaseI8–12U/mL,中性蛋白酶4–6U/mL。本发明提出了一种多酶消化体系,该体系由胶原酶I、胶原酶II、胶原酶IV、DNaseI和中性蛋白酶组成,通过协同作用高效解离肺组织,获得高活性的单细胞或细胞团体。该多酶消化体现组合在协同作用下,不仅能够显著提高猪肺组织的细胞释放率和干/祖细胞存活率,还可为后续类器官的高效形成提供稳定的细胞来源,为构建功能完整的猪肺类器官奠定了坚实基础。