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一种糖基转移酶突变体及在合成莱鲍迪苷中的应用

발명유효
2조회수
10청구항 · 3 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

柏文琴; 甄杰; 宋诙

IPC 분류

C12N 9/10 (2006.01)A23L 27/30 (2016.01)C12N 15/54 (2006.01)C12N 15/70 (2006.01)C12N 1/21 (2006.01)C12P 19/56 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)

本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其在合成莱鲍迪苷中的应用。本发明在如SEQID NO:1所示的糖基转移酶氨基酸序列的基础上进行单点突变以及多点突变,获得了催化活性提高的突变体。所述的糖基转移酶突变体的催化活性、底物专一性和/或底物特异性发生变化,在特定位点的突变可显著地提高酶对特定底物催化活性。通过对得到的突变序列进行诱导表达、蛋白纯化获得突变酶。以突变酶为催化剂,以UDPG为糖基供体可以明显的提高对底物甜菊苷ST、莱鲍迪甘A(RebA)以及莱鲍迪苷D(RebD)的催化反应效率。本研究构建的糖基转移酶UGT76G1突变体提高了其催化活力,并通过对反应体系的优化实现了莱鲍迪苷M的高效生产。