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기록

一种稳定过表达人ANT2的HEK293T细胞系构建及验证方法

발명유효
10청구항 · 1 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

金宁一; 李昌; 李乐天; 鲁会军; 李霄; 田明尧; 庄忻雨; 张赫; 尚超; 刘子睿; 哈卓; 谢宇飚; 蒋琦炜

IPC 분류

C12N 15/54 (2006.01)C12N 15/867 (2006.01)C12N 5/10 (2006.01)

本发明公开了一种稳定过表达人ANT2的HEK293T细胞系构建及验证方法,通过克隆人ANT2基因,将其构建到慢病毒表达质粒pLVX‑TRE3G中,与辅助质粒pLVX‑Tet3G共转染至HEK293T‑ACE2细胞,经嘌呤霉素和G418加压筛选和Western blot鉴定得到;结果显示,HEK293T‑ACE2‑ANT2细胞在6mg/L的Doxycycline,诱导12h时ANT2表达量最高;当诱导表达ANT2时,SARS‑CoV‑2感染后的病毒核酸载量及N蛋白表达水平显著降低,表明ANT2对SARS‑CoV‑2感染复制具有抑制作用,为探究ANT2在抗病毒感染中的作用提供了细胞模型和实验基础。