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脯氨酸羟基化酶可控表达载体、脯氨酸羟基化酶表达可控工程菌的构建方法及其应用

발명유효
1조회수
10청구항 · 9 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

张迷敏; 陈伟哲; 张利萍

IPC 분류

C12N 15/70 (2006.01)C12N 15/53 (2006.01)C12N 15/12 (2006.01)C12N 1/21 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)

本申请属于基因工程技术领域,具体涉及脯氨酸羟基化酶可控表达载体、脯氨酸羟基化酶表达可控工程菌的构建方法及其应用。本申请构建了一种重组载体,该重组载体包括Trp启动子、核糖体结合位点、多克隆位点以及标记基因;其中,Trp启动子的部分基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。采用该重组载体能够进一步构建目标蛋白可控的表达载体,通过改变培养基中的色氨酸浓度,即可精确控制目标蛋白的表达水平,高色氨酸抑制表达,低色氨酸则促进表达。该调控机制允许在菌体生长阶段降低目标蛋白的无效表达,减少代谢负荷,在不同阶段能够实时调控,为高效生产高质量的目标蛋白提供了解决方案。