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기록

一种适用于短链非特异性过氧化物酶的表达系统及其应用

발명유효
5청구항 · 2 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

陈必强; 张慧; 杨倩; 宋丹宁; 沈小伟; 逯新坤

IPC 분류

C12N 15/70 (2006.01)C12N 15/62 (2006.01)C12N 1/21 (2006.01)C12N 9/08 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)

本发明公开了一种适用于短链非特异性过氧化物酶的表达系统及其应用,属于酶工程及基因工程技术领域。本发明公开的表达系统,将带有SUMO和8HIS标签的短链非特异性过氧化物酶的核苷酸序列连接到pET28a载体上,得到重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),得到基因工程菌;将基因工程菌在ZYM5052液体培养基中采用两阶段控温培养,同时在培养基中添加5ALA。本发明使用了大肠杆菌自诱导系统,能够使摇瓶培养物在短时间内向高密度生长,培养基中含有丰富的营养物质,且在表达过程中不再需要监测细胞密度和添加IPTG。同时在大肠杆菌自诱导培养基中添加血红素前体5ALA,最终得到高活性的短链非特异性过氧化物酶。