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案件記録

一种高产积雪草酸的重组酿酒酵母菌株及构建方法

発明有効
3請求項 · 3 独立
§ Ⅰ

案件概要

IPC分類

C12N 15/81 (2006.01)C12N 15/90 (2006.01)C12N 15/53 (2006.01)C12N 15/52 (2006.01)C12N 1/19 (2006.01)C12P 33/00 (2006.01)C12R 1/865 (2006.01)

本发明公开了一种高产积雪草酸的重组酿酒酵母菌株及其构建方法;该方法利用CRISPR‑Cas9基因编辑技术,将白骨壤来源的C‑2α羟基化细胞色素P450氧化酶基因AmCYP716C53和积雪草来源的C‑23羟基化细胞色素P450氧化酶基因CaCYP716E19整合至底盘菌株ZY35的染色体911b位点,获得ZSA01;再将MCH5、FLX1、RIB1、FMN1和FAD1基因整合至ZSA01的1014a位点,得ZSA02;最后将AmCYP716C53整合至ZSA02的HMX1位点,构建工程菌株ZSA03。发酵结果表明,ZSA03在5 L发酵罐中达1 g/L,具备高效合成及工业化应用潜力。

外部リソース