一种敲除滩羊FABP4基因的单克隆细胞株及其构建方法与应用

本发明提供了一种敲除滩羊FABP4基因的单克隆细胞株的构建方法，该方法为：利用CRISPR/Cas9系统敲除滩羊FABP4基因，CRISPR/Cas9系统靶向滩羊FABP4基因的第一个外显子，滩羊FABP4基因的第一个外显子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；CRISPR/Cas9系统中的sgRNA靶向所述序列SEQ ID NO.1中5’端第2～8位核苷酸，sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；构建Lenti‑CRISPR V2‑Puro‑OaFABP4‑sgRNA重组质粒，经慢病毒包装、药物筛选和单克隆筛选后，得到敲除滩羊FABP4基因的单克隆细胞株。本发明还提供了上述单克隆细胞株的应用，用于构建滩羊前体脂肪细胞分化调控机制的细胞模型。本发明利用CRISPR/Cas9系统敲除滩羊FABP4基因，有助于研究FABP4基因在滩羊前体脂肪细胞分化中发挥的作用及调控机制，为控制脂肪过度蓄积提供新的分子靶标。