一种热启动激活CRISPR-Cas酶的方法及其在核酸检测中的应用

本发明涉及一种热启动激活CRISPR‑Cas酶的方法及其在核酸检测中的应用，属于基因检测技术领域。本发明提供一种通过温度控制CRISPR‑Cas系统中Cas酶活性的方法，在CRISPR‑Cas系统中添加单链DNA，在温度1条件下抑制Cas酶活性，在温度2条件下激活Cas酶活性；所述温度1条件下单链DNA与crRNA中的handle和/或spacer区域碱基互补配对，形成封闭的crRNA；所述温度2条件下封闭的crRNA热变性为单链。本发明可以通过控制温度启动Cas酶活性，实现单管内扩增与CRISPR反应的精准时序调控。操作简便且设备依赖低。成本较低且设计难度小。