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기록
牛奶中金黄色葡萄球菌快速精准检测方法
발명유효
6청구항 · 1 독립항
§ Ⅰ
개요
발명자
王妙姝; 付永猛; 范春刚; 高宝龙; 尚建伟; 杨赛; 庞雅会; 王晓丽; 田梦琪; 史晓梦; 边美玲; 韩志华
IPC 분류
C12Q 1/6851 (2018.01)C12Q 1/689 (2018.01)C12Q 1/6806 (2018.01)C12R 1/445 (2006.01)
本发明公开了牛奶中金黄色葡萄球菌快速精准检测方法,属于微生物检测技术领域,包括以下步骤:步骤S1,牛奶样品预处理;步骤S2,免疫捕获富集金黄色葡萄球菌;步骤S3,PMA处理;步骤S4,DNA提取;步骤S5,实时定量PCR检测:针对nuc基因进行实时定量PCR,通过标准曲线定量活性金黄色葡萄球菌浓度;待测牛奶样品经PMA处理和DNA提取后得到的高纯度基因组DNA溶液,进行实时定量PCR检测。本方案,通过免疫捕获富集替代传统培养步骤,将细菌富集时间缩短至1小时;结合实时定量聚合酶链反应技术,无需扩增后电泳检测,可直接在反应过程中通过荧光强度变化计算初始DNA模板量,实现精确定量。