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案件記録
非洲猪瘟病毒宿主限制性因子PML在抗病育种筛选中的应用
発明有効
10請求項 · 5 独立
§ Ⅰ
案件概要
発明者
王乐莅; 印遇龙; 贾真; 张峰; 何兵; 尹伊萍; 王世隆; 刘国龙
IPC分類
C12Q 1/6888 (2018.01)C12Q 1/6851 (2018.01)G01N 33/68 (2006.01)G01N 33/569 (2006.01)G01N 21/64 (2006.01)C12N 15/85 (2006.01)C12N 15/65 (2006.01)C12N 15/113 (2010.01)C12N 15/55 (2006.01)C12N 15/12 (2006.01)C12N 5/10 (2006.01)
本发明属于生物技术领域,具体公开了非洲猪瘟病毒宿主限制性因子PML在抗病育种筛选中的应用,包括:S1、利用CRISPR/Cas9系统构建靶基因敲除的猪源细胞系;S2、用携带荧光标记的非洲猪瘟基因缺失毒株感染所述靶基因敲除的猪源细胞系及未敲除的对照组猪源细胞系;S3、比较所述靶基因敲除的猪源细胞系和未敲除的对照组猪源细胞系中病毒的增殖水平。本发明通过CRISPR/Cas9技术构建PML敲除细胞系,用携带荧光标记的ASFV毒株感染敲除细胞和野生型细胞,通过荧光强度、qPCR及WB比较病毒增殖水平,证实PML是ASFV的宿主限制性因子,为培育抗非洲猪瘟基因编辑猪种及开发ASF防控技术提供了关键靶点和理论基础。
外部リソース