一种基于RPA-CRISPR/Cas12a实现葡萄灰霉病菌对甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂产生抗药性的可视化检测试剂盒

本发明公开了一种用于葡萄灰霉病菌对甲氧基丙烯酸酯类（QoIs）杀菌剂发生单碱基突变从而产生抗药性的检测方法。本发明基于RPA‑CRISPR/Cas12a体系，设计了针对杀菌剂靶向的基因并且包含突变位点的特异性引物对以及用于激活Cas12a切割活性的特异性crRNA，结合荧光报告探针，实现对灰霉病菌产生抗药性的快速、简便和特异性的肉眼可视化输出的检测方法。本发明的检测方法不需要复杂的仪器设备即可实现田间即时检测，具有良好的应用前景，为葡萄产业健康发展以及灰霉病的科学预防提供用药指导。