一种基于多巴胺和间苯二酚非可逆反应的脲酶活性检测方法

本发明公开了一种基于多巴胺和间苯二酚非可逆反应的脲酶活性检测方法，包括如下步骤：将待测样品、pH 7.0缓冲液和一定浓度的尿素溶液混合；向混合溶液中加入一定量的多巴胺和间苯二酚，在25‑45℃条件下，脲酶催化尿素水解，引起脲酶周围区域pH升高而形成局部碱性环境，进一步诱导多巴胺和间苯二酚反应生成蓝色荧光物，反应40‑120min后加入过量盐酸终止反应；使用荧光分光光度计检测反应液的荧光强度，并根据荧光强度‑脲酶浓度标准曲线计算出样品中的脲酶活性。本发明的基于多巴胺和间苯二酚反应的脲酶活性检测方法，具有检测速度快、灵敏度高、选择性好等优点。