炭疽蛋白纳米孔系统及其在蛋白测序中的应用

本发明涉及一种炭疽蛋白纳米孔系统及其在蛋白测序中的应用，属于纳米孔检测技术领域。旨在解决现有蛋白测序技术中通量低、精准度不足及纳米孔分辨率有限的问题。本发明构建炭疽蛋白PA63七聚体纳米孔电化学检测装置，采用不对称pH缓冲体系，通过分步加入Trypsin、Calpain‑1、Pancreatic Elastase酶和CarboxypeptidaseA酶等进行多肽酶切，施加电压驱动氨基酸通过纳米孔，采集电流信号并分析幅值、阻滞时间及频率特征，实现多肽氨基酸序列检测。本发明的纳米孔开孔电流小（fA级），分辨率高，结合多酶分步切刻增强检测精准性和灵敏度，为蛋白功能研究提供直接、高效的测序手段。