基于祖先序列重构的单宁酶、其突变体及编码基因与应用

本发明公开了基于祖先序列重构的单宁酶、其突变体及编码基因与应用，本方案提出了将ASR策略应用于细菌单宁酶的热稳定性改造，通过单次重构即获得半失活温度较野生型提高的祖先酶，其为工业酶的耐热改造提供了新的技术路线；本方案还通过ASR骨架寻优结合半理性精细迭代的组合改造策略，在保持优异热稳定性的同时，通过三轮迭代获得催化效率提升的突变体A29，突破了酶工程中常见的活性‑稳定性权衡，本方案的祖先酶制备工艺简便、成本可控；其中，突变体A29在茶汤高温澄清体系中，脱涩澄清效果显著优于野生型TanB和商用真菌单宁酶，表现为浊度最低、酯型儿茶素水解最彻底、感官品质最优，满足茶饮料热加工工艺的实际需求。