一种基于ERA-CRISPR-Cas12a的猪流行性腹泻病毒检测方法

本发明涉及动物疫病分子诊断领域，具体为一种基于ERA‑CRISPR‑Cas12a的猪流行性腹泻病毒检测方法，该方法以猪流行性腹泻病毒PEDV N基因保守区域为靶标，对待测样品RNA进行反转录后，采用ERA引物进行恒温扩增；将扩增产物与LbCas12a蛋白、特异性crRNA、单链DNA荧光报告探针和反应缓冲液混合，通过crRNA引导Cas12a识别PEDV靶序列。靶标存在时，Cas12a产生反式切割活性并切割荧光报告探针，释放荧光信号，据此判定样品中是否含有PEDV。该方法具有灵敏度高、特异性好、反应时间短、对大型仪器依赖程度低的特点，适用于PEDV的实验室检测和现场快速筛查。