浙江洛兮医学检验实验室有限公司

本发明涉及芯片涂层技术领域，提供了一种用于基因测序芯片的温敏嵌段共聚物涂层及其制备方法。涂层设置于基因测序芯片基底的反应区域表面，为POEGMA‑b‑PGMA嵌段共聚物。POEGMA嵌段具有温敏性，在低于LCST时呈舒展构象，在高于LCST时呈塌缩构象；PGMA嵌段提供环氧基官能团用于共价固定DNA探针。本发明首次将POEGMA的温敏构象变化与NGS测序流程进行时序匹配设计：低温舒展构象实现高密度DNA固定，高温塌缩构象形成物理屏蔽层抑制非特异性吸附。POEGMA在塌缩构象下仍保持优异抗污性能，克服了PNIPAM加剧非特异性吸附的缺陷。本发明具有高灵敏度、高准确性、可重复使用和温度可调控等优点，在基因测序领域具有广阔的应用前景。

本发明公开了一种基于HSA增强化学发光的DNA甲基化检测试剂盒及其应用，属于生物医学检测技术领域。该试剂盒包括：包被有抗5‑甲基胞嘧啶单克隆抗体的固相载体、碱性磷酸酶标记的抗5‑甲基胞嘧啶单克隆抗体以及化学发光底物液。所述化学发光底物液包含1,2‑二氧杂环丁烷类化合物和人血清白蛋白，其中人血清白蛋白作为发光增强剂。本发明通过免疫捕获DNA上的5‑甲基胞嘧啶，结合碱性磷酸酶催化的化学发光反应，实现了对DNA整体甲基化水平的检测。本发明方法不依赖基因序列，操作简便，灵敏度高，信号稳定，适用于肺癌早期筛查。