№ CN121320457A発明
有効一种基于受精卵注射的石斑鱼高效基因编辑方法
本发明属于基因编辑技术领域,具体涉及一种基于受精卵注射的石斑鱼高效基因编辑方法。将受精10分钟之内的石斑鱼受精卵浸泡于弱化绒毛膜培养基缓冲液中,在26℃下浸泡30‑60min后取出,并在胚胎发育至四细胞期前,向石斑鱼受精卵注射目标CRISPR/Cas9混合物;所述弱化绒毛膜培养基缓冲液使用灭菌海水配制,包括102.8mM氯化钠、10mM三羟甲基氨基甲烷、20mM甘氨酸、1mM还原型谷胱甘肽。本申请能够有效弱化石斑鱼受精卵绒毛膜的快速硬化,将硬化时间延长至四细胞期后,为显微注射获取了一个较长的操作窗口期,能够提高注射效率和注射成功率,解决了石斑鱼受精卵注射难题。
❖海南大学三亚南繁研究院; 海南省种业实验室甘瑞海; 石闯; 李志; 王忠卫; 骆剑; 文鑫; 蔡孝廉; 胡晨昊; 刘怡玲§ 2/7 請求項C12N 15/89 (2006.01), C12N 15/10 (2006.01), C12N 5/10 (2006.01)