一种基于受精卵注射的石斑鱼高效基因编辑方法

本发明属于基因编辑技术领域，具体涉及一种基于受精卵注射的石斑鱼高效基因编辑方法。将受精10分钟之内的石斑鱼受精卵浸泡于弱化绒毛膜培养基缓冲液中，在26℃下浸泡30‑60min后取出，并在胚胎发育至四细胞期前，向石斑鱼受精卵注射目标CRISPR/Cas9混合物；所述弱化绒毛膜培养基缓冲液使用灭菌海水配制，包括102.8mM氯化钠、10mM三羟甲基氨基甲烷、20mM甘氨酸、1mM还原型谷胱甘肽。本申请能够有效弱化石斑鱼受精卵绒毛膜的快速硬化，将硬化时间延长至四细胞期后，为显微注射获取了一个较长的操作窗口期，能够提高注射效率和注射成功率，解决了石斑鱼受精卵注射难题。