一种高效电转染缓冲液及其制备方法与应用

本发明公开一种高效电转染缓冲液及其制备与应用，属于真核细胞基因导入领域。针对C2C12小鼠成肌细胞现有电转染效率低、细胞死亡率高、分化潜能受损及试剂昂贵等问题，本发明提供专用缓冲液，配方含220 mM蔗糖、30 mM甘露醇、20 mM海藻糖、10 mM HEPES、1.2 mM MgCl，并添加10 μM白藜芦醇和0.005% Pluronic F‑68，pH 7.4。制备时分别配制基础母液及添加物母液，混合后调pH。使用时采用质粒或siRNA与细胞按特定比例混合电转，电转后立即用预温培养基复苏。本发明缓冲液使GFP阳性转染率达62.8%，同时维持较高细胞存活率（OD=0.46，24h），且不影响C2C12细胞后续成肌分化能力，成本不足商品化产品的千分之一，适用于高通量基因过表达和敲低实验。