用于高产GHK的重组载体、重组菌及发酵方法
本发明公开了用于高产GHK的重组载体、重组菌及发酵方法,属于生物医药技术领域。本申请的重组表达载体包含一个由T7/lac杂合启动子控制的双顺反子表达盒,依次包含编码(GHK)多肽的第一顺反子和编码胰蛋白酶原的第二顺反子,n为2至200的整数。将该载体转入大肠杆菌BL21,获得的重组菌经IPTG诱导后,可同步表达(GHK)多肽与胰蛋白酶原。在发酵过程中,胰蛋白酶原被活化并实现对(GHK)多肽的原位酶切,从而高效释放GHK。本发明将传统多步工艺整合为“一步发酵”,简化了生产流程,降低了纯化难度,实施例显示GHK产量最高可达3.9 g/L,为GHK的规模化生物制造提供了高效、便捷的新策略。