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用于高产GHK的重组载体、重组菌及发酵方法
발명유효
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10청구항 · 3 독립항
§ Ⅰ
개요
발명자
李洁; 汪仁; 朱新宁; 周正雄; 李晓丹; 孙彬; 李佳维; 刁季晨
IPC 분류
C12N 15/70 (2006.01)C12N 15/11 (2006.01)C12N 15/57 (2006.01)C12N 1/21 (2006.01)C07K 5/083 (2006.01)C12P 21/06 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)
本发明公开了用于高产GHK的重组载体、重组菌及发酵方法，属于生物医药技术领域。本申请的重组表达载体包含一个由T7/lac杂合启动子控制的双顺反子表达盒，依次包含编码(GHK)多肽的第一顺反子和编码胰蛋白酶原的第二顺反子，n为2至200的整数。将该载体转入大肠杆菌BL21，获得的重组菌经IPTG诱导后，可同步表达(GHK)多肽与胰蛋白酶原。在发酵过程中，胰蛋白酶原被活化并实现对(GHK)多肽的原位酶切，从而高效释放GHK。本发明将传统多步工艺整合为“一步发酵”，简化了生产流程，降低了纯化难度，实施例显示GHK产量最高可达3.9 g/L，为GHK的规模化生物制造提供了高效、便捷的新策略。