长治医学院

本发明提供了一种苯酞类化合物的合成方法，属于有机合成化学技术领域。该方法以邻甲酰基芳甲酸或邻甲酰基芳甲酸酯为原料，以廉价易得的异丙醇为还原剂，以质子酸为催化剂，在六氟异丙醇促进下，于加热条件下反应，高效制备苯酞类化合物。与现有技术相比，本发明避免了金属催化剂成本高昂、实验条件严苛及产物金属残留等问题；所用质子酸催化剂价廉，且对水和空气不敏感；所用异丙醇还原剂绿色廉价，规避了常规方法中用金属硼氢化物或氢气作还原剂时存在的燃爆风险。该方法底物兼容性优良，能以高收率制备苯酞类化合物，操作简便，工艺稳定，适合工业化放大生产。

本发明涉及一种苯并硼唑类化合物的合成方法。该方法以邻烷酰基芳基硼酸为原料，以异丙醇为氢供体，以质子酸为催化剂，以六氟异丙醇为促进剂，在加热条件下经一锅法反应同步实现还原及成环反应，制得苯并硼唑类化合物。本发明合成路线简短，操作便捷，所用异丙醇廉价、安全且对水和空气不敏感，有效避免了常规方法中使用金属硼氢化物所引发的燃爆风险以及硼酸盐副产物残留导致的纯化难题。此外，本发明方法底物兼容性优良，能够以高收率制备包括抗真菌药物他伐硼罗以及其他多个高活性苯并硼唑类化合物在内的目标产物，工艺稳定，重现性好，适合工业化放大生产。

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及CRISPR/Cas9介导的通用型基因编辑阳性细胞筛选报告系统。该系统包括动物细胞通用型的筛选报告载体和CRISPR/Cas9表达载体；通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组，同时筛选报告载体上通用的sgRNA引导Cas9蛋白打靶其载体骨架上的双荧光基因及抗性基因筛选报告表达框，经同源重组修复后荧光基因和药物抗性基因表达框被修复。该通用型基因组编辑筛选报告系统可以实时反映转染细胞的核酸酶活性，并可以广泛用于细胞任意位点基因组编辑阳性细胞的简单、高效筛选和富集。