一种烟酰胺单核苷酸NMN合成的重组恶臭假单胞菌构建方法及应用

本发明提供了一种烟酰胺单核苷酸NMN高效合成的重组恶臭假单胞菌及构建方法及应用，以恶臭假单胞菌KT2440为底盘微生物，将来源于噬菌体的T7 RNA聚合酶通过反向筛选的方法将其整合进入恶臭假单胞菌KT2440基因组UPP基因位点，进一步运用CRISPR/Cas9基因编辑技术，依次敲除烟酰胺单核苷酸(NMN)代谢途径基因PncC、PncB、UshA、NadD、NadE、MazG、NudC、NudF等，在实现T7启动子在该菌株中的正常转录表达后，采用载体表达的方法，游离过表达NMN合成途径中限速酶，分别为外源基因BaPRS、VpNadV及BMpnuC,最终该工程菌在5L发酵罐补料发酵的条件下，能够高效合成烟酰胺单核苷酸NMN，通过诱导发酵26h,烟酰胺单核苷酸NMN产量即可达到32.76g/L。