一种油茶叶片原生质体洗液中胞外囊泡的提取方法及应用

本发明公开了一种油茶叶片原生质体洗液中胞外囊泡的提取方法及应用。所述方法包括如下步骤:（1）取完整无病害的油茶叶片，剪去叶柄，超纯水清洗后，用滤纸吸干水分；（2）将清洗后的叶片放入加有浸润液的无针注射器筒内，采用抽真空浸润，然后将浸润后的叶片离心，获得油茶叶片原生质体洗液；（3）将原生质体洗液进行分级超速离心，收集上清液。（4）将上清液，经针式过滤器滤去细胞碎片，得滤液；（5）将滤液再离心，去除大囊泡和/或微颗粒沉淀，收集上清液；（6）将上清液加入超速离心管中离心，去除上清，得胞外囊泡沉淀；（7）用预冷PBS轻柔重悬胞外囊泡沉淀，重悬液再经离心，去除上清液，获得洗涤后的胞外囊泡沉淀。