一种基于酶法和高通量的发酵液中胞苷含量的检测方法

本发明涉及生化检测领域，公开了一种基于酶法和高通量的发酵液中胞苷含量的检测方法，包括提供包含尿苷磷酸化酶、二氢嘧啶脱氢酶、葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶及相关辅酶底物的第一试剂，和包含胞苷脱氨酶的第二试剂。检测时，先将样品与第一试剂混合进行背景吸光度监测；再加入第二试剂启动特异性反应，胞苷被催化为尿苷，尿苷经级联酶反应消耗还原型辅酶，同时辅酶被再生系统循环放大信号。通过监测特定波长吸光度的下降速率来确定胞苷含量。本发明通过采用两步加样法，有效扣除样品基质干扰，提升了检测准确性；利用辅酶再生循环的设计，放大了检测信号，提高了灵敏度；结合多孔微板自动化操作，实现了高通量检测，提升了效率。