一种高效生产胞苷酸的工程菌株及应用

本发明公开了一种高效生产胞苷酸的工程菌株及应用，涉及工程菌株和应用技术领域，菌株宿主为Escherichia coli BL21（DE3），菌株通过 CRISPRCas9 双 gRNA 系统同时敲除 ppnP 基因和 ppnN 基因，从而降低内源性核苷及核苷酸降解活性，所述双 gRNA 系统分别靶向 ppnP 和 ppnN 的开放阅读框架中的两个不同位点。本发明一种高效生产胞苷酸的工程菌株及应用，本发明利用CRISPR‑Cas9双gRNA系统，靶向并同时敲除大肠杆菌基因组中的ppnP和ppnN基因，显著降低宿主菌株内源性核苷酸降解酶的活性，从而有效提高胞苷和胞苷酸的稳定性。通过该基因敲除，改造后的工程菌株表现出显著的5′‑胞苷酸合成效率提升，并且副产物生成显著减少，产品的纯度和产率均优于传统方法。