一种肝素前体多糖高效胞外分泌的基因工程菌及其构建方法与应用

本发明涉及肝素前体多糖技术领域，公开了一种肝素前体多糖高效胞外分泌的基因工程菌及其构建方法与应用。本发明利用CRISPR‑Cas9介导的基因编辑技术增加‑表达框在大肠杆菌基因组中的拷贝数，强化了肝素前体多糖前体的合成；后过表达两种糖基转移酶基因基因、基因，加速肝素前体多糖链的合成及延长；并筛选得到能够同步强化肝素前体多糖转运系统的基因、基因、基因，筛选得到的基因、基因、基因基因能够协同作用减少肝素前体多糖前体胞内积累，从而形成“供体合成‑链延伸‑跨膜转运”三级代谢网络。最终，构建了一株能够促进肝素前体多糖胞外分泌从而高效合成肝素前体多糖的EcN基因工程菌株。