一种甜味蛋白巴西甜Brazzein纯化方法

本发明涉及生物技术领域，具体地，本发明涉及一种甜味蛋白巴西甜Brazzein纯化方法。本发明提供了一种甜味蛋白巴西甜Brazzein纯化方法，能够有效去除色素、无机盐及杂蛋白，获得高纯度的巴西甜蛋白。具体实施中，发酵液来自高产巴西甜Brazzein的里氏木霉工程菌,通过多次高速离心实现固液分离，调节pH值后使用D201树脂和活性炭去除杂蛋白和色素。通过三级过滤去除残留活性炭，得到巴西甜蛋白粗提液。利用3kDa膜过滤浓缩，加热处理后高速离心收集上清，最后冷冻干燥得到巴西甜蛋白冻干粉。实验结果显示该方法可明显提高目的蛋白的纯度，并显著提高目的蛋白的浓度。