红色糖多孢菌DNA删减方法及应用

本发明涉及基因工程技术领域，公开了红色糖多孢菌DNA删减方法及应用。本发明提供CRISPR/Cas编辑文库设计策略可以库容上限设计密集覆盖基因组的文库，同时靶向基因与基因间区；并且可以兼容所有不同类型的CRISPR/Cas工具；可以按需配置区间划分、序列间隔、脱靶判定等参数，获得更高效的靶点；此外还可以拓展设计串联多个靶点的guide RNA的文库。本发明采用CRISPR/Cas结合内源非同源末端连接系统的方式对红色糖多孢菌进行DNA删减，质粒构建更加简单，一轮操作时长在1个月以内，大大缩减了红色糖多孢菌DNA删减的工作量和时长。本发明为红色糖多孢菌基因编辑提供高效工具，具有广阔的应用前景。